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大鼠芳香烴受體elisa試劑盒實驗注意事項

發表時間:2020-03-16 16:45

大鼠芳香烴受體elisa試劑盒實驗注意事項:

1加樣:

實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;

加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;

作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。

2.溫育:

如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;

用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;

96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;

3.洗板:

手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;

洗板機洗板時應經常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;

為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數;

實驗流程:

1.實驗前標準品、試劑及樣本的準備;

2.加樣標準品及樣本50μL,37℃孵育30分鐘;

3.洗板5次,加酶標試劑50ul,37℃孵育半小時;

4.洗板5次;加入顯色液A,B各50ul,37℃孵育顯色15分鐘

5.加終止液50μL,立即450nm讀數。

6.計算


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