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細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是公平的

發(fā)表時(shí)間:2019-04-11 11:52

    對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好至關(guān)重要的考驗(yàn)。

在消化的過程中,加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是公平的。

具體操作:

1) 首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗 1-2 遍,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。

2) 然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。


3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入 0.3 ml 左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入 1 ml 左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打 2-3 遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用 2 ml 左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。

4)把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。也可以用新的胰酶。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)。

5)對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,必須分多批多次消化,這樣才能大限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠優(yōu)。


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