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小鼠20S蛋白酶體(20SP)elisa檢測試劑盒操作步驟

發(fā)表時間:2021-10-07 15:43

小鼠20S蛋白酶體(20SP)elisa檢測試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

AHR芳香烴受體抗體

ATRN吸引素抗體

ABCA1腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1抗體

AKT2蛋白激酶B2

Angiopoietin 2血管生成素2抗體

Aromatase芳香化酶/細胞色素P450/雌激素合成酶抗體

Adenosine Receptor A2a腺苷A2A受體抗體

AKAP95蛋白激酶A錨定蛋白95抗體

ASBT頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運體蛋白抗體

ADAM8去整合素樣金屬蛋白酶8抗體

AADACL3芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白3抗體

ACN9ACN9蛋白抗體

ADAR1 (N-terminus)雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(N端)

AMPK alpha 2腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體

ADK腺苷酸激酶抗體

A2ML1α2巨球蛋白樣蛋白1抗體 α2ML1

3-Apr細胞凋亡相關(guān)蛋白3抗體

Actin肌動蛋白α/α-SMA/α Actin抗體

ABCB7ATP結(jié)合蛋白家族7抗體

ASCL2ASCL2蛋白抗體

phospho-Ataxin 1(Ser775)磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體

phospho-ATF1 (Ser63)磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體

phospho-ATF2 (Ser480)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Thr51 + Thr53)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Thr69 + Thr51)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Thr73 + Thr55)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2 (Thr71 + Thr53)磷酸化活化復制因子2抗體

phospho-ATF2(Thr71)磷酸化活化復制因子2抗體



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