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轉基因元件CaMV35終止子LAMP試劑盒實驗步驟

發表時間:2022-09-21 14:11

轉基因元件CaMV35終止子LAMP試劑盒實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。

②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

BTBD6蛋白抗體

BMP內皮細胞調節蛋白抗體

丙肝病毒NS5A反轉錄蛋白8抗體

骨形態發生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內切酶抗體

骨形態發生蛋白9抗體

微管蛋白β輔助因子D抗體

鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體

有絲分裂蛋白BUB3抗體

p60TRP蛋白抗體

博萊霉素水解酶抗體

短蛋白聚糖抗體

BTB/POZ結構域蛋白3抗體

巴爾得-別德爾綜合征相關蛋白12抗體

堿性亮氨酸拉鏈蛋白BZW1抗體

骨形態發生蛋白受體1B抗體

Bcl2相互作用蛋白1抗體(轉化相關基因8蛋白)

骨形態發生蛋白5抗體

骨形態發生蛋白15抗體

Bcl-2樣蛋白2抗體

殺菌/通透性增強蛋白抗體

Bcl-2抗體

腦轉錄因子4蛋白抗體

膽鹽激活脂肪酶抗體

3-羥丁酸脫氫酶抗體

長鏈脂肪酸酰基輔酶A水解酶抗體

磷酸化乳腺癌易感基因1抗體

磷酸化β分泌酶抗體

磷酸化相關死亡促進因子抗體

磷酸化相關死亡促進因子抗體



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