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產(chǎn)品分類(lèi)
PGR Elisa Kit 
PGR Elisa Kit
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英文名稱 : Rat progesterone receptor, PGR Elisa Kit
貨號(hào) : EY-00R1486
規(guī)格 : 96T/48T
品牌 : 上海一研
價(jià)格 :
0.00
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PGR Elisa Kit原理:

ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。

PGR Elisa Kit 組成:

序號(hào)

名稱

規(guī)格

1

酶標(biāo)包被板

96 孔*1 可拆卸板

2

酶結(jié)合物

10ml*1

3

標(biāo)準(zhǔn)品

1ml*6

4

緩沖液

6ml*1

5

顯色劑 A 液

6ml*1

6

顯色劑 B 液

6ml*1

7

終止液

6ml*1

8

濃縮洗滌液(*100)

50ml*1

9

封板膜

1

10

使用說(shuō)明書(shū)

1

自備材料

1)蒸餾水。

2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。

3)振蕩器及磁力攪拌器等。

PGR Elisa Kit 標(biāo)本要求

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

2.操作步驟

1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照2 孔、空白對(duì)照 1

孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測(cè)樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,

3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用

5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外。

7.溫育:操作同 3。

8.洗滌:操作同 5。

9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

PGR Elisa Kit 數(shù)據(jù)計(jì)算

1. 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:各標(biāo)準(zhǔn)品 OD 值減去底色即減去空白孔 OD 值,以 6 個(gè)標(biāo)準(zhǔn)

品的 OD 值為縱坐標(biāo) y,以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo) x,繪制曲線圖,如圖示,

并計(jì)算出回歸方程 y=ax+b。

2. 將待測(cè)樣品的 OD 值代入方程式,計(jì)算各組樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即

為樣品的實(shí)際 ABP 濃度。

3. 敏感度:1.0 pg/ml

圖片1.png

注意事項(xiàng):

1. 實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。

2. 加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免**孔與最后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響

實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性。

3. 孵育:嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。

4. 反應(yīng)時(shí)間的控制:加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化,如果顏色較深,請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。

5. 建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高,應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

6. 建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線,試用幾個(gè)標(biāo)本),如果對(duì)本試劑盒有任何疑問(wèn),可和所購(gòu)經(jīng)銷(xiāo)商聯(lián)系,

如果因運(yùn)輸過(guò)程導(dǎo)致試劑盒失效,可要求調(diào)換,但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

PGR Elisa Kit安全性

1. 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。

2. 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:2-8℃

2.有效期:6個(gè)月


買(mǎi)家數(shù)量成交時(shí)間
正品保障

確保所有產(chǎn)品都是原裝正品

優(yōu)質(zhì)服務(wù)

優(yōu)質(zhì)服務(wù),售后無(wú)憂

安全包裝

統(tǒng)一包裝,保障產(chǎn)品安全運(yùn)輸

正規(guī)發(fā)票

機(jī)打發(fā)票,附箱送達(dá)

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