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產(chǎn)品分類
人正常肝細(xì)胞 
人正常肝細(xì)胞
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簡(jiǎn)稱 : L-02
種屬 :
貨號(hào) : E1836
價(jià)格 :
0.00
培養(yǎng)基 : MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS ?
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產(chǎn)品介紹

細(xì)胞名稱:人正常肝細(xì)胞

形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

特征特性: L - 02細(xì)胞建系鑒定于1980年(葉秀珍等,1980)。該細(xì)胞是一株正常肝細(xì)胞系,具有典型的肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征,可用于多種實(shí)驗(yàn)研究。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法: 1:

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況: C72

凍存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

產(chǎn)品名稱

人正常肝細(xì)胞

英文簡(jiǎn)稱

L-02

狀態(tài)

貼壁

細(xì)胞冷凍保存:

1.凍存液:92%完全培養(yǎng)基+8%DMSO(可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件自行選擇)

2.降溫步驟:4度10min,-20度2h,-80過(guò)夜后液氮保存。

細(xì)胞培養(yǎng)的操作步驟:

1.人正常肝細(xì)胞吸走用于培養(yǎng)基,加入3-5mL PBS后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞;

2.吸干凈PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,輕輕搖晃培養(yǎng)皿使胰酶浸沒(méi)細(xì)胞表面,培養(yǎng)瓶放37度培養(yǎng)箱消化;

(細(xì)胞對(duì)于消化比較敏感,消化過(guò)度會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞傳代死亡漂浮或者傳代后不長(zhǎng)。細(xì)胞消化到細(xì)胞間隙變大但未脫落,可以輕輕吹下時(shí)即可終止,禁止消化到細(xì)胞完全漂浮。混勻細(xì)胞時(shí)盡量輕柔,不要吹出大量氣泡。)

3.加入6-8ml完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹下細(xì)胞混勻;

4.將混勻的細(xì)胞1000rpm(約150g)離心3min,棄上清,再用新鮮培養(yǎng)基重懸37度培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng);

傳代比例: 不同細(xì)胞生長(zhǎng)速度不一,具體傳代比例視細(xì)胞生長(zhǎng)速度而定,大部分細(xì)胞適用1:3-1:4傳代,生長(zhǎng)較慢的細(xì)胞可以1:2傳代。


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